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抗猪流行性腹泻病毒单克降抗体细胞株的建立及初步应用

 
 
发布时间:  2001年09月14日 15:23:31
发布IP:  0.0.0.0
商家:  商务伙伴?
重庆科学技术咨询中心 

以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒(PEDV),通过蔗糖密度梯度离心,对其进行纯化,获得结 构较为完整的病毒颗粒,病毒ELISA效价为1:3x10(5次方),蛋白含量为369mg/mL,将提 纯PEDV免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,融合率为956%,用间 接ELISA筛选并进行三次再克隆,阳性率达100%,共获得15株能稳定分泌特异性抗PEDV我隆 抗体(McAb)的杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的染色体数平均在90-110之间,其所分泌抗体具有高 度特异性,腹水ELISA效价为1:103-1:106。混合单抗在新生猪的猪体保护试验证明, 这些单抗不论在体内或体外,对PEDV均有中和作用,试验猪可以得到抗体的保护耐过不死, 而病每对照组的猪只全部死亡,将混合单抗用于PED的发病场,保护率达91%。另外还建立了 PPA-ELISAMcAb阻断ELISA及McAb免疫荧光试验等快速诊断方法。

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